miRNA的檢測

miRNA的檢測

Real-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短（~22 nt）帶來的定量最大難題而引入靶向特異性的反轉錄引物，該RT引物可以與成熟miRNA結合，形成反轉錄引物/成熟miRNA復合物，并在miRNA的5’末端延伸。這樣就得到一個較長的反轉錄擴增因子，為進一步做實時定量PCR提供了符合要求的摸板。

檢測流程與原理：

提供樣品：

請提供新鮮且足量的樣本，組織>100~200 mg，RNA模板/DNA模板>5 μg；

提供信息：

待測miRNA名稱；詳細的背景資料：樣本來源、豐度、相關文獻等；

?交付成品：

設計合成的熒光標記引物探針等實驗材料；

?交付報告：

詳細的實驗步驟、完整的實驗報告、標準曲線、擴增曲線、溶解曲線、軟件分析結果。