細(xì)胞株構(gòu)建

細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞。因此，欲構(gòu)建細(xì)胞株，首先需獲得穩(wěn)定的細(xì)胞系。構(gòu)建流程如下：

1.   細(xì)胞培養(yǎng)（原核：大腸桿菌，真核：CHO細(xì)胞）

2.   質(zhì)粒的瞬時轉(zhuǎn)染。

3.   向轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞培養(yǎng)基中加入抗生素規(guī)定濃度的抗生素進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株篩選。

4.   Western blot或ELISA檢測蛋白的表達(dá)情況，篩選比較高克隆進(jìn)行傳代并保存。

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