HE/化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)

蘇木素(Hematoxylin)-伊紅(Eosin)染色法，簡稱HE染色法。蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色提供良好的核漿對比染色，是細(xì)胞化學(xué)染色常用的一種方法。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1.        樣品制備：對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS 洗滌3次。

2.        樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。

3.        染核：蘇木素染液染色2-3min，自來水洗滌。

4.        分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。

5.        染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來水洗滌。

6.        吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹膠封片。

7.        若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時(shí)間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可。