技術 | 原核蛋白表達系統

關于細菌表達——由于其性質，細菌表達系統是一種理想的蛋白質表達系統。它通常是生產重組蛋白和抗體的。到目前為止，許多細菌已經被很好地研究。在大量細菌中，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌細胞系是**的重組蛋白表達宿主。它們在適宜條件下以極低的成本快速復制，而表達水平高，這種特性使其成為大規模生產的有效和經濟的方式。他們的基因組已*測序，遺傳背景和代謝途徑****。另外，由于結構簡單，細菌比真核生物更容易轉染。這些期望的特征使表達過程更容易和更快速。但在某些方面，優勢也是不利的。可以在細菌中...

怎么確定大腸桿菌被噬菌體侵染了呢？

噬菌體（phage）是侵襲細菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學性狀的遺傳物質。噬菌體必須在活菌內寄生，有嚴格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結構和互補性。噬菌體是病毒中尤為普遍和分布廣泛的群體。通常在一些充滿細菌群落的地方，如：泥土、動物的腸道里，都可以找到噬菌體。噬菌體分兩種溫和噬菌體和毒性噬菌體前者不會讓大腸桿菌死亡但是它的基因會整合到大腸桿菌中做PCR檢測一下基因可以確定后者直接讓coil.死亡平板涂布培養板子上會形成噬斑（plaque）可作為判定...

艾柏森免疫原性評價

在臨床前和臨床試驗中評價免疫原性是生物技術藥物申請臨床試驗和注冊的重要內容。艾柏森生物遵照FDA和EMA的指導原則開發了SensitiveImmunogenicityAssessmentTechnology®(SIAT)技術評價藥物的免疫原性，包括體內研究、離體研究、體外研究及生物信息學研究方法，可提供經驗證的檢測方法、類定量描述藥物誘導的抗體反應水平（滴度）、抗體的特性檢測、抗體產生對療效、毒性和藥動學的影響等內容，并預測在人體內潛在的免疫原性強弱，為生物技術藥物的...

安諾倫代理VMRD品牌

VMRD(VeterinaryMedicalResearch&Development)公司是1981年由D.ScottAdams，DVM，PhD創立的，公司位于美國華盛頓，其產品廣銷國內外，是一家專門從事開發和制造獸醫診斷檢測試劑盒和相關試劑的公司，提供的產品主要包括診斷試劑盒，熒光試劑盒，抗體，免疫試劑盒等，公司的理念是為客戶提供高質量、高效率的產品和服務，在這樣的理念支撐下公司對動物生產者，獸醫疫苗制造商，政府機構，制藥公司和獸醫工作者在提高動物健康方面產生了深遠的影響。...

抗體&蛋白純化服務

蛋白純化是利用不同蛋白間內在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質的污染，而利用各蛋白質的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異，利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。艾柏森生物可以提供大規模蛋白純化、融合標簽蛋白純化、無標簽蛋白純化等多種蛋白純化技術服務。艾柏森生物蛋白純化服務包括：1.抗體純化（ProteinA/G）2.工業級別大規模純化服務3.膜蛋白純化服務4....

大腸桿菌在表達蛋白過程中越來越少？

大腸桿菌表達系統是目前應用*泛地蛋白表達系統。它具有：遺傳背景清楚；易于培養和控制；轉化操作簡單；表達水平高；成本低；周期短等特點。同時是常用也是經濟實惠的蛋白表達系統，在基因表達技術中發展最早。主要可能有兩種原因，一種是大腸在加入IPTG等誘導劑后大腸停止生長或者裂解，這時候我們要考慮蛋白本身對該菌是有一定毒性的，這時候我們可以選擇一些采用嚴緊控制的宿主菌株，比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了，當我們發現出現大面積搖瓶中細菌量逐漸降低甚至培養基回復到澄...

如何對包涵體蛋白進行表達與復性

關于包涵體的復性一直是生物制藥的瓶頸，包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化。一、包涵體蛋白的表達在平板上挑取單菌落，接種于含有氨芐青霉素和卡那霉素抗性的5mlLB培養基中，37℃過夜培養，然后轉接到100mlLB培養基中，37℃培養至A600為0.4~0.6時，加入IPTG至終濃度為0.5mmol/L誘導3.5h。8000r/min離心5min收集菌體，加入10ml50mmol/LTris-HCl，冰浴下超聲波破碎后12000r/min離...

多克隆抗體制備的常見問題解析

多克隆抗體制備能識別出與免疫原蛋白具有高同源性的蛋白，或者從非免疫原物種的組織樣品中篩選靶蛋白，例如當未測試物種中的抗原性質未知時，有時會使用多克隆抗體。可識別多個結構域，即使原始抗原的一些空間結構或者序列發生小變化或者部分抗原決定簇變化，仍可以識別抗原，因此有更大的適應性。多克隆抗體制備的常見問題解析：1、免疫動物該如何選擇？選擇宿主動物時，一般要考慮兩個問題：（1）免疫效果能否保證。特別是對于蛋白抗原的情況，為了保證免疫成功，就要求宿主動物與抗原來源物種之間有較遠的親緣關...