淺析多抗制備的正確方法

　　多抗制備方法：當(dāng)將抗原注射入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)時(shí)，一系列抗體生成細(xì)胞會(huì)不同程度的與抗原結(jié)合，受抗原刺激后在血液中產(chǎn)生不同類型的抗體，這種由一種抗原刺激產(chǎn)生的抗體稱為多克隆抗體。多克隆抗體中不同的抗體分子可以以不同的親和能力與抗原分子表面不同的部分一抗原決定簇相結(jié)合。
 

　　將抗原導(dǎo)入敏感動(dòng)物體內(nèi)后，可刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞系統(tǒng)，尤其是淋巴結(jié)和脾臟中的淋巴細(xì)胞大量增殖。如圖所示，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)初次免疫和二次免疫的應(yīng)答有明顯的不同。通常初次免疫應(yīng)答往往比較弱，尤其是針對(duì)于易代謝，可溶性的抗原。注射后大約7天，在血清中可以觀察到抗體但抗體的濃度維持在一個(gè)較低的水平，在大約10天左右抗體的滴度會(huì)達(dá)到所需值。但同種抗原注射而產(chǎn)生的二次免疫應(yīng)答的結(jié)果明顯不同，和初次免疫應(yīng)答相比抗體的合成速度明顯增加并且保留時(shí)間也長(zhǎng)。
 

　　免疫應(yīng)答的動(dòng)力學(xué)結(jié)果取決于抗原和免疫動(dòng)物的種類，但初次和二次免疫應(yīng)答之間的關(guān)系是免疫應(yīng)答的一個(gè)重要特點(diǎn)。。三次域以后的抗原注射所產(chǎn)生的應(yīng)答和二次應(yīng)答結(jié)果相似：抗體的滴度明顯增加并且血清中抗體的種類和性質(zhì)發(fā)生了改變，這種改變被稱為免疫應(yīng)答的成熟，具有重要的實(shí)際意義。通常在抗原注射4-6周后會(huì)產(chǎn)生具有高親和力的抗體。
 

　　多抗制備的主要目的在于在免疫動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生適當(dāng)?shù)目贵w。由于純化的抗原適合產(chǎn)生抗體，因此在注射前通常采用一些經(jīng)典的方法，比如柱層析、分級(jí)萃取、亞細(xì)胞分離等進(jìn)行抗原的分離和純化。如果多肽抗原在SDS/PAGE中為可見的單一帶，抗原從凝膠中的抽提可作為純化的步驟。